主编推荐 ‖ 基于艰难梭菌tcdC基因的新型LAMP检测方法的研发及临床诊断效能评估

导 读

艰难梭菌（Clostridioides difficile, CD）是抗生素相关性腹泻（antibiotic-associated diarrhea, AAD）的主要病原体，已成为全球医院获得性腹泻最常见的病原体之一。CD致病性取决于毒素表达：产毒株可分泌毒素A（tcdA编码）、毒素B（tcdB编码）及二元毒素，其中tcdA/B受致病决定区内tcdC（负调控）、tcdD（正调控）及tcdE（膜孔蛋白）协同调控。RT027高毒株因毒素高表达易引发重症，临床表现为腹泻、假膜性肠炎，严重者可进展为中毒性巨结肠或脓毒症休克。由于CD检测条件受限，我国尚未将其纳入医院感染重点监测目标，这在一定程度上影响了疾病后续的诊治。快速鉴别艰难梭菌感染（Clostridioides difficile infection, CDI）及高产毒株对早期临床诊断和精准治疗至关重要。

目前，CD鉴定主要基于病原学检测、毒素检测、基因检测等方法。国际金标准（产毒培养或细胞培养中和试验）因操作复杂未常规应用于临床。毒素A/B酶免疫分析(EIAs)特异度高但灵敏度受标本限制，超灵敏毒素检测技术尚未普及。谷氨酸脱氢酶（GDH）检测虽快速灵敏，因无法区分产毒/非产毒株，仅作初筛。核酸扩增检测（NAAT）（如PCR/qPCR）兼具良好的灵敏度和特异度，但高成本制约了其临床推广。因此，开发兼具快速、高灵敏度/特异度及低成本的毒素基因检测技术对优化CDI诊疗体系具有重大意义。

基于艰难梭菌tcdC基因的新型LAMP检测方法的研发及临床诊断效能评估

作者：肖园园¹，段菊屏²，周景翔¹，黄琴³，卿琰³，王海波³，吴安华^1,4,5，李春辉^1,4,5

单位：1. 中南大学湘雅医院医院感染控制中心；2. 湖南中医药大学附属长沙市中医医院；3. 湖南大学分子诊断与分子影像联合实验室；4. 中南大学湘雅医院超级耐药菌感染防治研究中心；5. 国家老年疾病临床研究中心（湘雅医院）

摘  要

目的 研发一项快速鉴定艰难梭菌并能明确高产毒株的检测方法，开展临床评估。

方法 利用环介导等温扩增（LAMP）法，基于tcdC、tcdA、tcdB基因来鉴定艰难梭菌，并评估该检测技术的灵敏度、特异度和总体一致性。

结果 共完成499例疑似艰难梭菌感染腹泻住院患者粪便标本检测，艰难梭菌检出率为12.8%(64/499)，其中产毒艰难梭菌的检出率为10.8%(54/499)。本检测方法针对tcdA的灵敏度为87.2%，特异度为98.9%，阳性预测值为89.1%，阴性预测值为98.6%；对tcdB的灵敏度为88.2%，特异度为99.6%，阳性预测值为90.0%，阴性预测值为98.7%。不同菌株总毒素量各有不同，但A+B+菌株平均产毒量（1.79μg/mL）高于A-B+菌株（0.72μg/mL）和A-B-菌株（<0.10 μg/mL）。

结论 本便携式高通量LAMP检测方法能快速、高效鉴定艰难梭菌并且明确高毒株。

引文格式

肖园园,段菊屏,周景翔,等.基于艰难梭菌tcdC基因的新型LAMP检测方法的研发及临床诊断效能评估[J]. 中国感染控制杂志,2025,24(4):451-459. DOI:10.12138/j. issn.1671-9638.20255458.
XIAO Yuanyuan, DUAN Juping, ZHOU Jingxiang, et al. Development and clinical diagnostic efficacy of a novel LAMP method targeting the tcdC gene in Clostridioides difficile[J]. Chin J Infect Control, 2025,24(4):451-459. DOI:10.12138/j. issn.1671-9638.20255458.