【科学探索】anti-TFPI：揭秘TFPI Kunitz域，开启血友病治疗新篇章

血友病是一种罕见的遗传性出血性疾病，FVIII/FIX浓缩物的替代治疗一直被视为血友病管理的金标准。然而，抑制物的产生是其最主要的并发症之一，约30%的血友病A患者和5%的血友病B患者在接受替代疗法后出现抑制物，导致治疗效果显著下降。对于这类患者，尽管可使用旁路药物（BPA）如活化凝血酶原复合物（aPCC）或重组活化因子VII（rFVIIa）作为替代方案，但其疗效通常不及标准替代治疗，且在长期出血控制和关节保护方面也存在明显局限。此外，这些治疗方案均需静脉输注，给患者带来显著的治疗负担，进而影响生活质量和依从性¹。近年来，随着非凝血因子替代疗法（NFTs）的研发，血友病治疗取得了显著进展。这些创新疗法旨在解决传统替代疗法在治疗血友病A（HA）和血友病B（HB）方面的局限性，其中组织因子通路抑制剂（anti-TFPI）疗法通过靶向TFPI核心功能域——Kunitz域为血友病治疗开辟新路径。

血友病可分为血友病A和血友病B两种，前者为凝血因子Ⅷ（FⅧ）缺乏，后者为凝血因子Ⅸ（FⅨ）缺乏，分别由相应的凝血因子基因突变所致²，治疗核心在于重建有效的凝血酶生成过程，以实现止血效果¹。TFPI是血友病治疗领域一个新兴的靶点，对VIIa和Xa具有抑制作用³。

TFPI是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，包含三个Kunitz结构域，由内皮细胞持续分泌至血浆中，并储存于血小板和巨核细胞内，在血小板活化时释放，且Kunitz结构域通过抑制关键的凝血酶来调控凝血过程⁴。研究者分别对其结构域和抗凝机制进行了一系列的研究，发现TFPI的主要抗凝方式是以FⅩa依赖的方式使TF‑FⅦa复合物失活，通过外源性凝血途径抑制凝血的起始阶段。该过程需要两步完成：TFPI通过Kunitz 2与FⅩa结合形成TFPI‑FⅩa复合物，抑制FⅩa活性；TFPI‑FXa复合物中TFPI通过Kunitz 1与TF‑FⅦa复合物中的FⅦa活性部位结合，形成稳定TF‑FⅦa‑TFPI‑FⅩa四联体复合物，而后被单核细胞等吞噬清除，从而实现对TF‑FⅦa复合物的抑制³，其中Kunitz 2与FⅩa活性位点的直接结合为TFPI的抗凝血活性奠定基础⁵。因此，抑制TFPI功能可能恢复FXa和FVIIa-TF的活性，使血友病患者体内达到足够的凝血酶水平以支持凝血（图1）。

图1 血友病非凝血因子疗法的作用机制⁶

在此基础上，anti-TFPI创新疗法应运而生。anti-TFPI通过靶向TFPI  Kunitz 2结构域以减少FXa抑制，恢复外源性凝血通路活性，从而增加凝血酶产生并增强止血⁶。

在深入解析TFPI分子调控机制的基础上，其作为血友病治疗靶点的转化医学价值已通过anti-TFPI疗法的临床应用得到充分验证。

非临床实验表明，anti-TFPI能够在体外和体内以浓度依赖性方式增强凝血酶的生成⁷，且anti-TFPI单独给药或与旁路药物联合给药均可增加血友病A或B血浆中的体外止血作用，而不产生过量的凝血酶⁷。通过体外凝血酶生成分析（TGA）和稀释凝血酶原时间（dPT）分析，评估了向健康志愿者血浆以及血友病A型、血友病B型和伴有抑制物的血友病A型患者血浆中添加anti-TFPI的效果，结果显示anti-TFPI能够增强凝血活性并促进止血。由此可见，anti-TFPI疗法通过靶向TFPI Kunitz 2结构域精准调控凝血网络，在非临床及临床试验中展现出显著的止血增强效果，为血友病治疗提供了突破传统因子替代疗法的创新性解决方案。

血友病长期依赖凝血因子替代治疗，但抑制物产生、静脉输注负担及疗效局限性仍是临床核心挑战。在此背景下，TFPI作为凝血调控网络的关键节点，其Kunitz 2结构域的精准干预为突破治疗瓶颈提供了全新路径。TFPI通过K2与FXa结合启动抗凝级联，而anti-TFPI疗法通过特异性阻断K2-FXa相互作用，实现了对凝血启动阶段的“靶向调控”，既恢复外源性凝血通路活性，又避免过度凝血风险，更通过精准干预TFPI K2结构域，为进一步改善患者预后奠定了重要科学基础。