J Ethnopharmacol：舒肝健脾方通过调节肝星状细胞中miR-193a-3p/TGF-β2减轻肝纤维化的体内外研究

背景：肝纤维化（LF）是终末期肝病的常见病理过程，已被广泛研究。其发展和进展受到多种因素的影响，如乙型肝炎病毒感染、饮酒、炎症、糖尿病和药物暴露。尽管进行了广泛的研究，肝纤维化的有效治疗方法仍然难以肯定，因此确定安全有效的治疗方法至关重要。

中药舒肝健脾方（SGJPF）传统上被用于治疗各种慢性肝脏疾病。先前的研究表明，SGJPF抑制肝纤维化（LF）大鼠肝星状细胞（HSCs）的激活，miR-193a-3p可能是LF中的关键分子。然而，SGJPF通过miR-193a-3p调控HSCs活化的机制尚不清楚。

目的：该研究旨在确定SGJPF对LF的作用是否与其在四氯化碳（CCl4）诱导的LF小鼠模型和TGF-β1诱导的JS-1胞中对miR-193a-3p和TGF-β2的调控有关。

方法：建立CCl4诱导的LF小鼠模型，通过观察肝组织病理学变化、胶原沉积、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和胶原-I的表达，评价SGJPF抗纤维化作用。为了研究miR-193a-3p在hsc活化中的作用，将miR-193a-3p模拟物和抑制剂转染到TGF-β1诱导的JS-1细胞中。

使用miRDB、TargetScan 8.0、RNA-seq和双荧光素酶报告基因检测确定miR-193a-3p的潜在靶标。最后，通过CCK-8、EDU、scratch、RT-qPCR和Western blotting检测，在TGF-β1处理的JS-1细胞中评估SGJPF对HSCs活化和miR-193a-3p/TGF-β2轴的影响。

结果：SGJPF在CCl4诱导的LF组织中显著减轻肝损伤和纤维化，抑制HSCs活化，降低TGF-β2水平，升高miR-193a-3p表达。此外，miR-193a-3p在转染miR-193a-3p模拟物的HSCs中上调，而在转染miR-193a-3p抑制剂的HSCs中下调。高水平的miR-193a-3p，结合miRNA模拟物，抑制造血干细胞的激活、增殖和迁移。

TGF-β2是miR-193a-3p负调控的靶标，部分逆转了miR-193a-3p对TGF-β1诱导的HSCs活化的影响。SGJPF还能降低TGF-β1处理的JS-1细胞中HSCs的活化、增殖和迁移。此外，在TGF-β1诱导的JS-1细胞中，用含SGJPF的血清和miR-193a-3p抑制治疗可以恢复HSCs的活化、增殖和迁移。

结论：该研究表明，SGJPF可改善CCl4诱导的肝纤维化，其机制可能与HSCs中miR-193a-3p和TGF-β2的调控有关。这些发现为SGJPF提供了新的药理学基础，并提出了通过调节miRNA治疗LF的新策略。

原始出处：

Zhou Q, Zhang X, Chen S, et al. Shugan Jianpi Formula attenuate liver fibrosis via regulation of miR-193a-3p/TGF-β2 in hepatic stellate cells: An in vivo and in vitro study. J Ethnopharmacol. Published online November 26, 2024. doi:10.1016/j.jep.2024.119120