Critical Care：多重 PCR 技术助力免疫抑制患者呼吸衰竭感染快速诊断

近年来，肿瘤血液病患者管理的改善及免疫抑制新药的广泛应用，使得免疫功能低下患者入ICU比例持续上升，其主要入院原因之一为急性呼吸衰竭，通常由细菌、真菌或病毒感染引起。面对感染的临床紧急性，临床常采用经验性广谱抗生素治疗，但因病原识别滞后，易引发治疗不足或过度，两者均与患者预后不良相关。此外，广谱抗生素的滥用增加耐药菌风险，也与高死亡率有关。为贯彻抗菌药物管理策略，缩短病原判定时间、提高诊断准确率成为迫切需求。

而多重PCR技术通过扩增病原体DNA，能够在数小时内快速精准地检测常见肺炎细菌和耐药基因。生物膜阵列技术含18种细菌和7种耐药基因靶点，已在免疫正常患者中展示了良好的性能，但对免疫抑制患者尤其在危重状态下的效用仍缺乏充分数据。

近日，发表在Critical Care杂志的一项研究，旨在围绕免疫抑制患者急性呼吸衰竭（ARF）严重感染的快速诊断与抗生素管理。该研究是一项单中心回顾性研究，纳入2020年3月至2023年3月期间，法国蒙彼利埃大学医院ICU收治的114例≥18岁免疫抑制成人患者（肿瘤、血液病、器官移植或免疫抑制治疗），因呼吸衰竭需机械通气且初次48小时内采集深部呼吸道标本进行BFPPmPCR及传统培养检测。排除机械通气48小时后发生的呼吸机相关肺炎。

对样本进行PFPPmPCR与传统培养检测并记录微生物种类及数量，依据传统培养结果将BFPPmPCR结果定义为真阳性、真阴性、假阳性、假阴性，计算敏感性（Se）、特异性（Sp）、阳性及阴性预测值（PPV、NPV）。同时回顾性分析mPCR结果公布后抗生素方案调整情况及合理性。

图：流程示意图

研究结果

1. 研究人群概况

共计114名免疫抑制患者被纳入，男性64.9%。免疫抑制主要由血液病（35.1%）和肿瘤（35.1%）构成，SOLID器官移植及免疫治疗患者分别占17.5%和12.3%。患者中重症指数高，SAPS II中值为53，SOFA中值8.5，ICU病死率39.5%。多数患者无近期抗生素使用史（除预防性抗真菌治疗）。

2. 呼吸道样本及病原体检测情况

样本类型以支气管肺泡灌洗液（BAL）为主（74.6%），采样中位时间距入ICU 1.2天。BFPPmPCR阳性率为36.8%，以肠杆菌科细菌（51%，其中以大肠埃希菌28%居首）、流感嗜血杆菌19%、金黄色葡萄球菌17%为主。PCR鉴定的假阳性中较多为流感嗜血杆菌和金黄色葡萄球菌，多数采自抗生素使用后超过24小时的BAL。

传统培养阳性率为40.4%，同样以肠杆菌科为主，但也检测到多数非BFPPmPCR覆盖菌群，如放线菌、表皮葡萄球菌、乳酸杆菌及不动杆菌属等低致病菌。

图 肺炎相关主要细菌检测频率比较（mPCR vs 传统培养）

3. 诊断性能分析

• 排除传统培养未覆盖的病原菌后，BFPPmPCR与传统培养完全一致率达84.2%，部分一致率89.5%。
• 敏感度89%（95%CI 67%-99%）、特异度83%（95%CI 74%-90%）、阳性预测值52%、阴性预测值98%。
• 高阴性预测值表明PCR为阴时，几乎可排除主流病原体感染。
• 其中假阳性多见于经抗生素预处理的样本，提示PCR对死菌DNA敏感度较高。
• 多数假阴性和传统培养特异菌（厌氧菌、表皮葡萄球菌等）与临床致病性较低，抗菌谱覆盖广泛。

图3 mPCR与传统培养结果对应情况分析（TP、FP、FN、TN分布）

4. 抗生素治疗影响

• mPCR结果公布后，临床抗生素方案调整发生于20例（17.5%），其中11例实施抗生素“降阶”以减少广谱用药，2例方案调整为抗生素谱的“升级”。
• 修改方案89.5%经事后培养结果确认合理。
• mPCR检测时间为2.54小时，显著快于传统培养4872小时，缩短诊疗决策周期。

研究讨论与意义

免疫抑制患者由于免疫防御机制衰弱，易感染复杂多样病原。此外，抗生素使用可能使传统培养敏感性减低，延迟诊断带来不良后果。BFPP mPCR以较高的敏感性和阴性预测值，在识别感染病原方面表现出极佳的辅助价值。

本研究首次系统评估BFPP mPCR在免疫抑制危重患者肺炎中的准确性和临床应用，结果支持其作为快速病原学检测工具，辅助临床医生快速调整抗菌治疗，实现个体化精准用药。特别是其快速排除检测菌种感染的能力，有助于抗生素“降阶”，避免广谱滥用，降低耐药风险和药物相关毒副作用。

尽管假阳性存在，需谨慎结合临床判断，避免因PCR检出死菌DNA导致过度治疗。另一方面，PCR覆盖菌种有限，未监测的潜在病原仍需结合临床和传统培养综合评估。未来进一步优化检测面及结合真菌、病毒等多靶标检测的联合方案或将更精确支持免疫抑制患者诊治。

此外，研究较大样本量、实际临床环境下评估mPCR疗效调整的数据，提升了结果的说服力。研究也提醒，在抗菌策略制定中重视快速诊断技术应用，是改善免疫抑制患者预后的关键方向。

原始出处

Contier J, Platon L, Benchabane N, et al. Diagnostic performance of Pneumonia multiplex PCR in critically ill immunocompromised patients. Critical Care. 2025;29:310. DOI:10.1186/s13054-025-05528-y.